293细胞
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293细胞

Column:产品应用-细胞破碎 Time:2022-05-22
293细胞

293细胞

293细胞是人肾上皮细胞系,有多种衍生株,比如HEK293,293T/17等,来源都是人胚胎肾细胞,其极少表达细胞外配体所需的内生受体,且比较容易转染,是一个很常用的表达研究外源基因的细胞株。

293T细胞由293细胞通过基因技术派生出的细胞系,是经过腺病毒E1A基因的转染,能表达SV40大T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区。许多真核表达载体如pcDNA3.1中含有SV40病毒的复制起始位点,可以在表达SV40病毒T抗原的细胞系中复制,从而提高外源基因的表达水平。因此293T细胞广泛应用于病毒包装。用磷酸钙转染效率可高达50%。蛋白表达水平高,转染后2-3天用碱性磷酸酶分析可较容易地检测到表达的蛋白。瞬时转染293T细胞是过表达蛋白并获得细胞内及细胞外(分泌的或膜)蛋白的便捷方式。

中文名:293细胞

外文名:293 cellline

种属:人

形态特点:上皮细胞

产物或抗原:大T抗原

1.细胞名称

293细胞
2.形态特点
上皮细胞
致瘤性 +
产物或抗原 大T抗原
染色体核型 亚三倍体人细胞系。染色体众数为64,30%的细胞有64 条染色体。4.2%的细胞染色体数目更多。多数细胞der⑴t(1;15) (q42;q13),der⒆t(3;19) (q12;q13),der⑿t(8;12) (q22;p13),还有四条标记染色体,有的细胞另有5条标记染色体。der⑴与M8 (or Xq+)常常成对出现。N17 与 N22各有四条。值得注意的是多数细胞有三条X染色体,两条Xq+,一条Xp+。
细胞名称
293 和 293T
种属
组织来源

形态特点
上皮细胞
致瘤性
+
产物或抗原
大T抗原
染色体核型
亚三倍体人细胞系。染色体众数为64,30%的细胞有64 条染色体。4.2%的细胞染色体数目更多。多数细胞der⑴t(1;15) (q42;q13),der⒆t(3;19) (q12;q13),der⑿t(8;12) (q22;p13),还有四条标记染色体,有的细胞另有5条标记染色体。der⑴与M8 (or Xq+)常常成对出现。N17 与 N22各有四条。值得注意的是多数细胞有三条X染色体,两条Xq+,一条Xp+。
生长特性
粘附
文献评价
293细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒(Ad 5) DNA的永生化细胞。[RF32725]
表达转染的腺病毒5的基因。[RF32725]
早期报道认为此细胞含有Ad 5基因组左端和右端[RF32764],现已清楚仅含有左端序列。[RF50113]
此细胞系人腺病毒滴度高。
室温不贴壁,37℃几日后重新贴壁。
表达由整合素beta-1 亚基与玻基结合素受体 alpha-v 亚基组成的玻基结合素细胞表面受体. [RF33793]
The Ad5 insert was cloned and sequenced,and it was determined that a colinear seqment from nts 1 to 4344 is integrated into chromosome 19 (19q13.2).
传代
293:弃培养基,含0.25% 胰酶,0.03% EDTA 消化液洗涤,弃去,加1-2ml消化液室温或37℃消化。
加入新鲜培养基,吸出,分到新培养皿中。一传二至一传四。
293T:生长快,通常倍增时间不到一天。每3~4 天1:10至1:20稀释,5% CO2条件下培养。细胞贴壁疏松,可只用EDTA消化,不要用胰蛋白酶过度消化。
培养基更换
每2-3天一次
冻存液
95%培养基;5%,DMSO;culture medium 95%; DMSO,5%;50%培养液,10%DMSO, 40%血清。
培养条件
ATCC培养基:90%的MEM Eagle,加入2mM L-谷氨酰胺,1.5g/L碳酸氢钠,0.1 mM必需氨基酸,1.0 mM 丙酮酸钠;10%加热灭活的马血清
37℃培养



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